科研服务
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瑞源医学
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- 产品描述
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服务简介
本服务利用特异性抗体或标签融合蛋白进行亲和富集，从温和裂解液中捕获目标蛋白的天然复合物，联合高分辨LC-MS/MS定量蛋白质组学分析，并经过严格对照扣除，精准鉴定特异相互作用蛋白。可兼顾过表达筛选与内源互作解析，有效保留翻译后修饰与弱相互作用，广泛应用于信号转导、转录调控及药物靶标发现等研究。
技术路线
技术优势
生理相关性强：完好保留天然构象、翻译后修饰与瞬时相互作用。
特异性高：严格阴性对照扣除背景，结合质谱筛选，精准排除非特异结合。
灵敏度高：高分辨LC-MS/MS可鉴定低丰度互作蛋白。
灵活通用：适用多种标签系统的实验设计。
应用场景
药物靶标发现与机制研究
转录与表观调控机制
疾病突变功能研究
服务内容
服务内容 自然日 交付材料 pull down LC-MS：
A、提取总蛋白
B、表达成功的蛋白与总蛋白孵育
C、蛋白纯化
D、WB鉴定
12个 1、原始数据、结果图片
2、标准实验报告(含实验步骤、流程)
LC-MS质谱分析 24个 送样标准
类型 送样标准 运输条件 组织材料 5-10 g 干冰寄送，干冰使用量：1天（5 kg）、2-3天（10-20 kg）、3-5天（20-30 kg） 细胞样品 3-5×107个细胞 总蛋白样品 >1 mg 需要基因合成的序列 无 无 构建好的质粒
中间载体质粒
浓度>100 ng/μL，体积>20 μL；提供载体序列和抗性，无污染。 冰袋 含构建好质粒的菌液
含中间载体质粒的菌液
体积>500 μL；提供载体序列和抗性，无污染，去内毒。 干冰寄送，干冰使用量：1天（5 kg）、2-3天（10-20 kg）、3-5天（20-30 kg） 平板菌 无污染 常温 抗体 IP级别抗体>30 μL 干冰寄送，干冰使用量：1天（5 kg）、2-3天（10-20 kg）、3-5天（20-30 kg） 注意：
1、其余类型样品请提前与我司沟通；
2、干冰取样及运输，至少在送样前2天通知我司。
案例报告
1、原核表达结果
挑选克隆用于表达小试。表达结束后，吸取20 μL待检测样品，加入5 μL 5×蛋白loading buffer，混匀后于100℃煮沸5-10 min，吸取20 μL进行SDS-PAGE鉴定。结果如下（图1）：
图1 WB鉴定结果
A. SDS-PAGE检测，M：Marker，1-2：纯化前、纯化后。
B. WB鉴定，M：Marker，1-2：纯化前、纯化后。
2、Pull down
拉取总蛋白中与A蛋白互作的其他蛋白，Pull down的结果如下（图 2）。
图2 Pull down检测
3、质谱结果（部分结果图）
图3：差异表达蛋白聚类图
图4：差异表达蛋白GO注释分类统计图
声明：本公司出售产品只能用于科研目的，不得用于诊断或者治疗！
