科研服务
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- 产品描述
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▼ 服务简介
酵母高通量抗逆基因筛选服务能够快速筛选岀非模式抗逆物种资源中的多重逆境抗性相关的大量基因,利用酵母菌,在逆境筛选系统下,通过抗性梯度实验对基因组范围内的抗性相关基因进行筛查,利用蛋白组学寻找候选蛋白,进行蛋白水平上的表型验证。
▼ 高通量抗逆基因文库构建
实验流程
服务内容
▼ 高通量抗逆基因筛选
实验流程
技术优势
1、根据文献摸索合适的筛选条件
2、文库转化酵母后进行鉴定,确保高质量的酵母工作菌液,筛库结果可靠
3、提供 NGS 测序,检测全部阳性克隆
4、涂板 20个,可以提供阳性克隆实物交付
5、难以实现遗传转化的物种、酵母筛选后,在模式植物种进行验证结果准确性高服务内容
酵母逆境文库筛选
基本实验步骤 详细实验步骤 周期(工作日) 交付材料 酵母工作菌液制备 1、酵母工作菌液制备
2、酵母工作菌液PCR质检
7 个 1、阳性克隆NGS测序结果(根据测序结果而定)
2、一代测序结果
3、Word文档电子版项目报告(含实验数据)
4、 GO+KEGG分析结果
逆境条件摸索 3、配置逆境筛选条件5个不同 浓度培养基(逆境条件摸索)/高温/低温/干旱等逆境条件摸索 10 个 酵母筛选 4、酵母工作菌液涂布:15cm平板20个 5 个 阳性克隆鉴定 5、酵母菌落PCR鉴定
6、一代测序
5 个 筛选结果验证 7、筛选结果回转验证
8、数据整理和分析
5 个 NGS测序 9、NGS测序
10、数据整理分析
11、GO+KEGG分析
8 个 ▼ 抗逆基因表型验证
实验流程
1、过表达载体构建 -PYES2
2、转入至目的菌株
3、空载体 PYES2 转入空白目的菌株作为对照
4、梯度稀释点板
5、逆境处理培养基服务内容
实验步骤 周期(工作日) 交付材料 将目的基因构建到pYES2-NTB载体上 10 个 1、构建的重组质粒
2、电子版文库实验报告1份
逆境条件实验 15 个 ▼ 材料样品处理与保存
1、酵母抗逆基因文库筛选技术服务
类型
送样标准
运输条件
构建好的文库质粒
质粒浓度≥200ng/ul,质粒总量≥50ug;有鉴定测序文件;
冰袋
文库质粒菌液
每管体积≥1mL,提供至少2管;有鉴定测序文件;
干冰,1天(5kg)2-3天(10-20kg)3-5天(20-30kg)
2、酵母抗逆基因单基因验证技术服务
类型
送样标准
运输条件
待验证基因序列
无
无
构建好的基因质粒
质粒浓度≥100ng/ul,质粒体积≥30ul;有鉴定测序文件;
冰袋
基因质粒菌液
每管体积≥500ul;有鉴定测序文件;
干冰,1天(5kg)2-3天(10-20kg)3-5天(20-30kg)
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