实时荧光定量 PCR

实时荧光定量PCR技术（Real-time Quantitative PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入可与DNA产物特异性结合的荧光基团(包括荧光染料或荧光标记的特异性探针)，对PCR产物进行标记跟踪，随着PCR反应的进行，反应产物不断累积，荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环，收集一次荧光强度信号，这样即可通过荧光信号强度的变化实时监测整个PCR过程中产物量的变化，并结合相应软件对产物进行分析，可以得到荧光扩增曲线，从而计算待测样品中目的基因初始模版的量，常用于分析目的基因的表达水平的变化。

所属分类

常规分子生物学平台

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产品描述

技术原理

技术优势

1、使用Roche LightCycler® 96实时荧光定量PCR仪，高灵敏度、高重复性、高分辨率、动力学范围广，仪器稳定性有保障，数据能够比较真实的反映出样品中RNA的相对含量变化。

2、内参基因多样性：针对不同的物种材料，提供不同的内参设计方案，并非一律使用GAPDH或β-actin，科学的内参设计方案更加有利于提高荧光定量PCR数据可靠性。

3、荧光定量PCR检测实验中所用的试剂耗材搭配是经过我们多年的实验经验筛选优化，大多为进口的试剂耗材，优先质量，其次是成本。

4、多年的荧光定量PCR实验经验，批量化的流水线作业减少个体实验的误操作差异概率。

交付内容

1、RNA提取及浓度表格

2、检测数据（默认三次重复），2^-ΔΔCt分析数据

3、相对定量比对柱状图

4、扩增曲线及熔解曲线图

5、荧光定量PCR检测报告

材料样品处理与保存

1、取样方法及注意事项

快速收集

样本需要在采集、制备、储存、运输中尽量做到迅速和及时性，尽可能缩短样本采集到实验的周期，从而保证样本的质量和稳定性。

低温保存（鲜样样本）

采集样本离体后，如有分离步骤需要在4℃条件或冰上等低温环境下进行，分离好的样本立即置于液氮、干冰或-80℃冰箱中，并保证在实验前处于-80℃以下。

2、材料送样

类型	送样标准	运输条件
RNA样品	体积>20ul，需要质量较好无降解的RNA。需要提供琼脂糖电泳检测胶图，能清晰的看到28S和18S两条带。	干冰用量1 天（5kg），2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg），并密封。
材料样品	单个样品重量>1g。	干冰用量1 天（5kg），2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg），并密封。