科研服务
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- 产品描述
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技术背景
SMART 技术是由 Clontech 于 1996 年开发的，SMART 技术的名称来源于 switching mechanism at 5’ end of RNA template 的缩写，最初用于构建哺乳动物 cDNA 文库，后来也用于构建酵母 cDNA 文库。SMART 技术的原理是利用反转录酶的模板切换活性，将特异性的序列加到 cDNA 的 5’端，从而提高全长克隆的效率。
技术原理
技术优势
1、具备多种材料 RNA 提取方法，高质量 RNA 有效提高后续文库质量
2、完善的质检流程，文库进行 PCR 鉴定与测序，确保物种正确
3、提供后续文库售后和下游筛库指导
4、建库一年送三险，运输损坏险、储存不当险、意外丢失险，解决后顾之忧
5、根据不同的载体需求，提供文库个性化定制服务内容
核系统酵母文库（SMART 技术） 服务内容 周期（工作日） 交付内容 1、RNA 提取
2、mRNA 提取5 天 1、酵母文库甘油菌各 4 ml( 分 4 管）
2、酵母文库质粒（4 管大于 400 ug）
3、Word 文档电子版项目报告 ( 含实验数据 )
4、文库承诺达到以下指标 :
文库库容量 >1*107 CFU
平均插入片段 0.8-1.5 kb（因物种而异）空载率 <5 %3、cDNA 合成与接头连接（三框文库）
4、cDNA 均一化
5、重组到酵母载体 pGADT7 上和电转化
6、将获得的 cDNA 文库电转化至大肠杆菌感
受态细胞中进行克隆扩增
7、文库检测和质粒提取
8、数据整理和分析17 天 9、转录组测序、文库全测序、GO+KEGG 分析 15 天 膜系统酵母文库（SMART 技术） 服务内容 周期（工作日） 交付内容 1、RNA 提取
2、mRNA 提取5 天 1、酵母文库甘油菌各 4 ml( 分 4 管）
2、酵母文库质粒（4 管大于 400 ug）
3、Word 文档电子版项目报告 ( 含实验数据 )
4、文库承诺达到以下指标 :
文库库容量 >1*107 CFU
平均插入片段 0.8-1.5 kb（因物种而异）空载率 <5 %3、cDNA 合成与接头连接（三框文库）
4、cDNA 均一化
5、重组到酵母载体 pPR3-N 上和电转化
6、将获得的 cDNA 文库电转化至大肠杆菌感
受态细胞中进行克隆扩增
7、文库检测和质粒提取
8、数据整理和分析17 天 9、转录组测序、文库全测序、GO+KEGG 分析 15 天 酵母逆境文库（SMART 技术） 服务内容 周期（工作日） 交付内容 1、RNA 提取
2、mRNA 提取5 天 1、酵母文库甘油菌各 4 ml( 分 4 管）
2、酵母文库质粒（4 管大于 400 ug）
3、Word 文档电子版项目报告 ( 含实验数据 )
4、文库承诺达到以下指标 :
文库库容量 >1*107 CFU
平均插入片段 0.8-1.5 kb（因物种而异）空载率 <5 %3、cDNA 合成与接头连接（三框文库）
4、cDNA 均一化
5、重组到酵母载体 pYES2 - NTB 上和电转化
6、将获得的 cDNA 文库电转化至大肠杆菌感受态细胞中进行克隆扩增
7、文库检测和质粒提取
8、数据整理和分析17 天 9、转录组测序、文库全测序、GO+KEGG 分析 15 天 取样方法及注意事项
快速收集
样本需要在采集、制备、储存、运输中尽量做到迅速和及时性，尽可能缩短样本采集到实验的周期，从而保证样本的质量和稳定性。
低温保存（鲜样样本）
采集样本离体后，如有分离步骤需要在4℃条件或冰上等低温环境下进行，分离好的样本立即置于液氮、干冰或-80℃冰箱中，并保证在实验前处于-80℃以下。
样本寄送
样品名称简单、清晰、准确，填写好样品委托单后打印纸质版随样品一起邮寄。
样品包装：建议样品用锡箔纸、离心管包装，使用油性记号笔填写样本编号，再装入自封袋中，避免样品包装破损样品散落。
样品寄送：选择合适大小的泡沫盒，干冰用量1 天（5kg），2-3 天（10-20kg）3-5 天（20-30kg），并密封。
材料样品处理与保存
SMART建库
Gateway、In-Gate建库
取样注意事项
RNA
样品
>2ug
>400ug
需要质量较好无降解的RNA。需要提供琼脂糖电泳检测胶图，能清晰的看到28S和18S两条带。
植物组织（根茎叶种子）
单个样品重量>2g
需要至少一份备份样品
单个样品重量>10g
需要至少一份备份样品
（叶片/花/茎/种子）剪取适量新鲜新鲜样品；（根系）将根部泥土清洗干净后再将根系剪下来，用锡箔纸包好或者放入50mL 离心管中，写上编号，置于液氮速冻
植物组织（果实）
单个样品重量>10g
需要至少一份备份样品
单个样品重量>50g
需要至少一份备份样品
果实样品较大，如桃肉等，利用工具将果肉切成1-2cm块状大小，用锡箔纸包好或者放入50mL 离心管中，写上编号，置于液氮速冻
动物组织/昆虫
单个样品重量>2g
需要至少一份备份样品
单个样品重量>10g
需要至少一份备份样品
取适量的组织、昆虫样品，放入50mL 离心管中，写上编号，置于液氮速冻
真菌
单个样品重量>2g
需要至少一份备份样品
单个样品重量>10g
需要至少一份备份样品
真菌为液培状态，离心收集去除上清，放入50mL 离心管中，写上编号，置于液氮速冻，真菌为平板菌状态，需要使用封口膜封好，泡沫固定在泡沫盒内，常温或冰袋寄送。
动物细胞/ PBMC
单个样品细胞>1*107 cfu
需要至少一份备份样品
单个样品细胞>1*108 cfu
需要至少一份备份样品
细胞：用PBS将细胞洗下来，600g转速离心，弃上清，收集细胞，将整个EP管置于液氮速冻。PBMC：尽量使用采集后24h内的血液进行PBMC分离；体积为500-1000ul，使用无菌管保存，如果有抗凝剂最好加入抗凝剂，放-80℃保存。
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