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瑞源生物
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- 产品描述
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原理
蛋白磷酸化是指在蛋白质中添加磷酸基团的生化过程，由激酶催化并由磷酸酶逆转，通过改变分子构象与电荷来调控酶或其他蛋白活性，从而参与生命活动的调控。该过程可发生于丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸残基(以丝氨酸最常见)。
体外磷酸化检测实验是在体外模拟体内蛋白激酶催化的磷酸化反应，通过纯化底物蛋白/激酶、ATP(磷酸供体)及适宜缓冲体系，在受控条件下实现蛋白磷酸化，并检测其修饰状态与位点。
实验流程
应用场景
1、激酶-底物作用关系验证
2、磷酸化功能位点鉴定
3、蛋白互作与功能调控分析
4、药物靶点与抑制剂筛选
5、植物抗逆/发育等分子信号通路的机制研究
优势
1、反应体系可控：可精准调控反应时间、温度等条件，排除胞内背景干扰，结果特异性强；
2、直接验证：可直接验证激酶与底物磷酸化作用，规避体内间接调控、多级信号干扰问题；
3、核心位点验证：结合突变体实验可快速定位关键磷酸化位点，明确功能核心位点，为机制解析提供精准分子依据；
4、周期短、效率高：无需构建稳转转基因材料，体外生化反应快，大幅缩短验证周期；
5、适用范围广：可适配动植物、微生物等各类来源蛋白，支持多方向研究，通用性强；
6、体系稳定成熟：已建立自营标准化SOP，蛋白纯化、磷酸化反应体系成熟，稳定可控；
7、精准省心可靠：提供从蛋白表达纯化、体外激酶反应、位点验证到结果解析的一站式闭环技术服务；
8、定制化服务：可定制化优化反应条件，适配不同激酶-底物组合。
服务内容
收样标准
类型 送样标准 运输条件 五选一 需要基因合成的序列 无 无 构建好的质粒
中间载体质粒
浓度>100ng/μL，体积>20μL；
提供载体序列和抗性，无污染。
冰袋 含构建好质粒的菌液
含中间载体质粒的菌液
体积>500μL；
提供载体序列和抗性，无污染，去内毒。
干冰寄送，干冰使用量：1天（5kg）、2-3天（10-20kg）、3-5天（20-30kg） 平板菌 无污染 常温 纯化后的目标蛋白 >30μg 干冰寄送，干冰使用量：1天（5kg）、2-3天（10-20kg）、3-5天（20-30kg） 常见标签抗体无需提供 抗体 IP级别抗体>30μL 干冰寄送，干冰使用量：1天（5kg）、2-3天（10-20kg）、3-5天（20-30kg） 交付内容
实验材料 周期 交付材料 1、基因合成 / 载体构建 14天 1、原始数据、结果图片
2、标准实验报告(含实验步骤、流程)
3、含有目的基因的质粒及测序报告
4、实验剩余蛋白2、原核蛋白表达 20天 3、体外磷酸化检测
A、体外孵育反应
B、磷酸化检测（WB鉴定）
15天 案例展示
MBP-B（左）、His-A（右）蛋白纯化结果
A. CBB鉴定，M：Marker，1：诱导后样品，2：亲和纯化后样品。
B. WB鉴定，M：Marker，1：诱导后样品，2：亲和纯化后样品。
体外磷酸化检测
结果分析：磷酸化检测中，MBP-B和His-A单独孵育不会检测到磷酸化信号，而MBP-B和His-A同时孵育后可以检测到MBP-B的磷酸化信号，表明HIS-A在体外可以催化MBP-B的磷酸化。
声明：本公司出售产品只能用于科研目的，不得用于诊断或者治疗！
