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- 产品描述
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酵母双杂是一种利用酵母表达系统分析蛋白质相互作用的技术，它具有高度敏感性和广泛应用性。
技术背景
酵母双杂交系统是一种鉴定活细胞内蛋白质相互作用的研究方法，其原理是：Gal4 转录因子由 DNA 结合域（binding domain，BD）和转录激活域（active domain，AD）组成，二者可以分开独立表达为有功能的蛋白。当二者在物理空间上靠近时可以表现出完整的转录因子活性，基于此，把目的蛋白分别与 BD、AD 融合表达，当目的蛋白发生互作时，使得 BD、AD 在物理空间可以靠近，这时就能够表现出完整的转录因子功能，从而激活下游基因的表达。
技术优势
1、进行文库鉴定，选择高质量文库进行筛库，确保筛库结果可靠
2、质粒转化酵母后 pcr鉴定，确保质粒成功转化酵母
3、诱饵设置梯度浓度筛选，确保合适的筛选条件
4、涂板 20 个，提供阳性克隆、诱饵酵母菌液交付
5、提供 NGS 测序，检测全部阳性克隆
6、根据物种数据库信息，进行生信分析，挑选基因
7、可提供完善的下游验证实验材料样品处理与保存
1、酵母文库筛选（双/单杂）技术服务
2、酵母一对一验证技术服务
服务内容
酵母核文库双杂交筛选
详细实验步骤 周期（工作日） 交付材料 1、基因合成（密码子优化）/载体构建 10 个 1、阳性克隆测序结果（根据测序结果而定）
2、阳性克隆序列不少于15条
3、Word文档电子版项目报告（含实验数据）
4、诱饵质粒
5、 GO+KEGG分析结果
2、诱饵质粒的自激活检测 7 个 3、诱饵质粒与文库质粒共转
4、酵母筛选的条件优化
5、筛选结果测序
10 个 6、筛选结果回转验证
7、数据整理和分析
5 个 8、NGS测序
9、数据整理分析
10、GO+KEGG分析
8 个 酵母核系统双杂交一对一互作验证
详细实验步骤 周期（工作日） 交付材料 1、基因合成
基因合成（密码子优化）/载体构建
蛋白A载体构建至pGADT7
蛋白B载体构建至pGBKT7
10 个 1、构建的重组质粒
2、电子版文库实验报告1份
2、转化
重组质粒转化酵母细胞并进行自激活检验
7 个 3、互作验证
设置阳性对照、阴性对照组，互作验证
10 个
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