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    科研服务

    立足于生命科学,为基础研究领域科学工作者提供生物学高端技术服务

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    酵母单杂交文库筛选及验证

    酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸 - 蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别 DNA 结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析 DNA 结合结构域信息等。

    • 产品描述
    • 酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸 - 蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别 DNA 结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析 DNA 结合结构域信息等。

       

      技术原理

       

      技术优势

      1、进行文库鉴定,选择高质量文库进行筛库,确保筛库结果可靠  
      2、质粒转化酵母后 pcr鉴定,确保质粒成功转化酵母  
      3、诱饵设置梯度浓度筛选,确保合适的筛选条件  
      4、涂板 20 个,提供阳性克隆、诱饵酵母菌液交付  
      5、提供 NGS 测序,检测全部阳性克隆  
      6、根据物种数据库信息,进行生信分析,挑选基因  
      7、可提供完善的下游验证实验

       

      材料样品处理与保存

      1、酵母文库筛选(双/单杂)技术服务

      类型送样标准运输条件
      诱饵诱饵基因序列
      构建好的诱饵质粒质粒浓度≥100ng/ul,质粒体积≥30ul;有完整的测序文件;冰袋
      含构建好诱饵质粒的菌液每管体积≥500ul;有鉴定测序文件;干冰,1天(5kg)2-3天(10-20kg)3-5天(20-30kg)
      文库构建好的文库质粒质粒浓度≥200ng/ul,质粒总量≥50ug;有鉴定测序文件;冰袋
      文库质粒菌液每管体积≥1mL,提供至少2管;有鉴定测序文件;干冰,1天(5kg)2-3天(10-20kg)3-5天(20-30kg)

       

      2、酵母一对一验证技术服务

      类型

      送样标准

      运输条件

      诱饵/猎物基因序列

      构建好的诱饵/猎物质粒

      质粒浓度≥100ng/ul,质粒体积≥30ul;有完整的测序文件;   

      冰袋

      含构建好诱饵/猎物质粒菌液

      每管体积≥500ul;有鉴定测序文件;

      干冰1天5kg2-3天10-20kg3-5天20-30kg

      服务内容

      酵母单杂交文库筛选
      详细实验步骤周期(工作日)交付材料
      1、基因合成(密码子优化)/载体构建10

      1、阳性克隆测序结果(根据测序结果而定)

      2、阳性克隆序列不少于15条  
      3、Word 文档电子版项目报告(含实验数据)

      4、诱饵质粒

      5、GO分析和KEGG分析结果

      2、诱饵质粒的背景筛选7 个
      3、诱饵质粒转化和文库质粒转化  
      4、酵母筛选和条件优化  
      5、筛选结果测序
      10 天
      6、筛选结果回转验证  
      7、数据整理和分析
      5

      8、NGS 测序

      9、数据整理分析

      10、GO+KEGG分析

      8

       

      酵母单杂交一对一验证
      详细实验步骤周期(工作日)交付材料

      1、基因合成(密码子优化)/载体构建

      蛋白A载体构建至pGADT7

      启动子构建至pHIS2

      10 个

      1、构建的重组质粒

      2、电子版文库实验报告1份

      2、转化

      重组质粒转化酵母细胞并进行背景筛选实验

      7 个

      3、互作验证

      设置阳性对照、阴性对照组,互作验证

      10 个

       

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