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- 产品描述
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酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸 - 蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别 DNA 结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析 DNA 结合结构域信息等。
技术原理
技术优势
1、进行文库鉴定,选择高质量文库进行筛库,确保筛库结果可靠
2、质粒转化酵母后 pcr鉴定,确保质粒成功转化酵母
3、诱饵设置梯度浓度筛选,确保合适的筛选条件
4、涂板 20 个,提供阳性克隆、诱饵酵母菌液交付
5、提供 NGS 测序,检测全部阳性克隆
6、根据物种数据库信息,进行生信分析,挑选基因
7、可提供完善的下游验证实验材料样品处理与保存
1、酵母文库筛选(双/单杂)技术服务
类型 送样标准 运输条件 诱饵 诱饵基因序列 无 无 构建好的诱饵质粒 质粒浓度≥100ng/ul,质粒体积≥30ul;有完整的测序文件; 冰袋 含构建好诱饵质粒的菌液 每管体积≥500ul;有鉴定测序文件; 干冰,1天(5kg)2-3天(10-20kg)3-5天(20-30kg) 文库 构建好的文库质粒 质粒浓度≥200ng/ul,质粒总量≥50ug;有鉴定测序文件; 冰袋 文库质粒菌液 每管体积≥1mL,提供至少2管;有鉴定测序文件; 干冰,1天(5kg)2-3天(10-20kg)3-5天(20-30kg) 2、酵母一对一验证技术服务
类型
送样标准
运输条件
诱饵/猎物基因序列
无
无
构建好的诱饵/猎物质粒
质粒浓度≥100ng/ul,质粒体积≥30ul;有完整的测序文件;
冰袋
含构建好诱饵/猎物质粒的菌液
每管体积≥500ul;有鉴定测序文件;
干冰,1天(5kg)2-3天(10-20kg)3-5天(20-30kg)
服务内容
酵母单杂交文库筛选 详细实验步骤 周期(工作日) 交付材料 1、基因合成(密码子优化)/载体构建 10 个 1、阳性克隆测序结果(根据测序结果而定)
2、阳性克隆序列不少于15条
3、Word 文档电子版项目报告(含实验数据)4、诱饵质粒
5、GO分析和KEGG分析结果
2、诱饵质粒的背景筛选 7 个 3、诱饵质粒转化和文库质粒转化
4、酵母筛选和条件优化
5、筛选结果测序10 天 6、筛选结果回转验证
7、数据整理和分析5 个 8、NGS 测序
9、数据整理分析
10、GO+KEGG分析
8 个 酵母单杂交一对一验证 详细实验步骤 周期(工作日) 交付材料 1、基因合成(密码子优化)/载体构建
蛋白A载体构建至pGADT7
启动子构建至pHIS2
10 个 1、构建的重组质粒
2、电子版文库实验报告1份
2、转化
重组质粒转化酵母细胞并进行背景筛选实验
7 个 3、互作验证
设置阳性对照、阴性对照组,互作验证
10 个
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