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单链可变区片段是由抗体重链的可变区与轻链的可变区在一段肽链的连接下构成的小分子,是具有抗体活性的最小功能结构单位,是目前研究较多、应用较为广泛的重组抗体,其不包含抗体恒定区,但仍表现出与抗原的高亲和力,应用 Y2H 系统在真核细胞酵母内筛选scFv,其产生的抗体有可能保持天然的折叠状态从而更接近体内的真实水平。
纳米抗体即重链单域抗体VHH(veriable domain of hravy chain antibody)这类抗体缺少轻链,同时重链恒定区缺少CH1区。其中重链抗体的重链可变区VHH结构可以被单独克隆表达,并表达出与重链抗体相当的抗原结合活性。由于VHH的晶体宽度仅有2.5nm,长4.8nm,分子量约为15kDa,是目前已知的可以结合抗原的最小单位,因此也被称为纳米抗体。
瑞源生物科研人员建立了成熟的酵母表达纯化服务平台,提供优质的小分子抗体在毕赤酵母中的表达与纯化服务。
泛素(ubiquitin)可以分成两部分:N端(Nub)和C端(Cub),Nub和Cub有很强的亲和力。当在同一细胞中同时表达时,Nub和Cub会结合形成完整的泛素,会被泛素蛋白酶(UBPs)识别并切割。Nub第三位的异亮氨酸(I)突变成甘氨酸(G)后,Nub与Cub的亲和力大大降低。诱饵蛋白构建在Cub上,Cub融合转录因子LexA-VP16,猎物构建在NubG上。当诱饵与猎物互作,使得Cub与NubG靠近而形成完整的泛素,被UBPs识别并切割,被切下的转录因子LexA-VP16进入核内,启动报告基因(His,Ade,LacZ)的表达。