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    真核有参转录组

    真核有参转录组核心是以已注释的完整真核生物参考基因组为“坐标模板”,通过高通量测序(如 RNA-seq)捕获细胞内的全部转录本,再通过序列比对、注释、定量等生物信息学分析,解析转录本的结构、表达水平及调控规律。可以解决转录图谱的绘制、基因差异表达模式及进化分析等各方面研究问题,已经被广泛应用于临床诊断和药物研发等诸多领域。    

    • 产品描述
    • 服务描述

      真核有参转录组核心是以已注释的完整真核生物参考基因组为“坐标模板”,通过高通量测序(如 RNA-seq)捕获细胞内的全部转录本,再通过序列比对、注释、定量等生物信息学分析,解析转录本的结构、表达水平及调控规律。可以解决转录图谱的绘制、基因差异表达模式及进化分析等各方面研究问题,已经被广泛应用于临床诊断和药物研发等诸多领域。      

       

      应用领域

      农林领域:抗逆胁迫机制,生长发育机制,育种保护研究等。

      微生物领域:致病机理,耐药机制,病原体-宿主相互作用研究等。

      海洋水产:渔业资源,海水养殖,渔业环境与水产品安全等。

      基础医学、临床诊断:生物标志物,疾病机理机制,疾病分型,个性化治疗等。

       

      技术优势

      样本处理经验丰富:各类动植物组织和细胞、微生物、外泌体等。

      平台优势:llumina/T7双平台灵活可选、质控严格、数据质量高。

      分析内容丰富:分析丰富、可进行多种组学联合分析。

       

      服务流程

       

       

      生物信息学分析流程

       

      备注:标准报告包含所有黑色字体分析内容,不包含绿色字体分析内容

       

      样品接收标准

      样本

      要求

      备注

      新鲜植物组织

      ≥400 mg ,≥3个生物学重复

      液氮速冻,-80℃保存,干冰运输,1天(5kg)2-3天(10-20kg)3-5天(20-30kg)

      新鲜动物组织

      ≥200 mg,≥3个生物学重复

      新鲜培养细胞

      ≥8x107 个,≥3个生物学重复

      新鲜采集全血

      ≥4 mL,≥3个生物学重复

      菌体

      ≥400 mg,≥3个生物学重复

       

      服务流程、周期及交付

      服务流程工作日交付材料
      RNA提取及质检28

      1、原始数据、结果图片

      2、标准实验报告(含实验步骤、流程)

      3、生信分析:基因表达定量分析、基因差异表达分析、功能富集分析、基因结构分析

      文库构建及质控
      上机测序
      生信分析
      实验报告

       

      数据分析

      服务标准分析内容拟解决问题

       

       

       

       

       

       

       

      标准数据分析

      质控获得高质量数据
      参考基因组比对(有参)/denovo组装(无参)获得后续分析的基因
      新基因预测发现新基因
      基因表达水平获得基因的表达丰度
      表达差异分析鉴定差异基因表达情况
      功能注释与富集确定基因的功能特征及代谢通路
      蛋白互作网络分析利用网络图挖掘核心基因
      转录因子分析对差异基因进行转录因子注释
      可变剪切分析挖掘基因的不同剪切类型

       

       

       

      高级数据分析

      WGCNA获得与表型强关联的核心基因
      GSEA分析检验目标基因间的富集情况
      趋势聚类分析探讨基因的表达趋势模式
      基因融合分析探索基因的嵌合情况

       

      案例报告

      (1)基因表达水平分析

      基因表达水平计算

       

      图:不同表达水平区间的基因数量统计图

       

      (2)样本基因表达量总体分布

      图:各样本FPKM箱线图

       

      (3)RNA-seq 整体质量评估

      样本间相关性评估

      图:样本间相关系数热图

       

      (4)差异表达分析

       筛选差异基因

      图:差异表达基因统计柱状图

       

      (5)差异表达基因功能注释和富集分析

      图:差异基因 GO 富集柱状图

       

      (6)差异基因蛋白互作网络分析

      图:差异表达基因的互作网络图(top300)

       

      (7)转录因子分析

      (8)可变剪切分析

       

      图:可变剪切事件分类

       

       参考文献

      [1]Marcel Martin. (2011). Cutadapt removes adapter sequences from high-throughput sequencing reads. EMBnet.journal. (cutadapt).

      [2] Daehwan Kim, Ben Langmead, Steven L Salzberg. (2015). HISAT: a fast spliced aligner with low memory requirements. Nature methods. (HISAT2).

      [3] Simon Anders, Paul Theodor Pyl, Wolfgang Huber. (2014). HTSeq-A Python framework to work with highthroughput sequencing data. Bioinformatics. (HTSeq).

      [4] Love, M.I., Huber, W., Anders, S. (2014). Moderated estimation of fold change and dispersion for RNA-seq data with DESeq2. Genome Biology. (DESeq2).

      [5] Zuguang Gu, Roland Eils , Matthias Schlesner. (2016). Complex heatmaps reveal patterns and correlations in multidimensional genomic data. Bioinformatics. (ComplexHeatmap).

      [6] Robinson M. D., McCarthy D. J. & Smyth G. K. (2010). edgeR: a Bioconductor package for differential expression analysis of digital gene expression data. Bioinformatics. (edgeR).

      [7] Kanehisa M., M. Araki, et al. (2008). KEGG for linking genomes to life and the environment. Nucleic acids research. (KEGG).

      [8] Shannon P, Markiel A, Ozier O, Baliga NS, Wang JT, Ramage D, Amin N, Schwikowski B, Ideker T. [2003]. Cytoscape: a software environment for integrated models of biomolecular interaction networks. Genome Research.

      [9] Shen S., Park JW., Lu ZX., Lin L., Henry MD., Wu YN., Zhou Q., Xing Y. [2014]. rMATS: Robust and Flexible Detection of Differential Alternative Splicing from Replicate RNA-Seq Data. Proc Natl Acad Sci USA. (rMATS).

      [10] Pertea M, Pertea GM, Antonescu CM, Chang TC, Mendell JT& Salzberg SL. [2015]. StringTie enables improved reconstruction of a transcriptome from RNA-seq reads. Nature Biotechnology. (Stringtie).

       

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