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    4D-DIA 定量蛋白质组学

    4D蛋白质组学是基于新一代timsTOF Pro2质谱仪,通过捕集离子淌度(TIMS)与同步累积连续碎裂(PASEF)扫描模式进行差异定量蛋白质组学研究。以更少上样量、更快扫描速度,实现蛋白质组、修饰组学在覆盖深度、灵敏度、通量方面的全面性提升。

    • 产品描述
    • 服务介绍

      4D蛋白质组学是基于新一代timsTOF Pro2质谱仪,通过捕集离子淌度(TIMS)与同步累积连续碎裂(PASEF)扫描模式进行差异定量蛋白质组学研究。以更少上样量、更快扫描速度,实现蛋白质组、修饰组学在覆盖深度、灵敏度、通量方面的全面性提升。

       

      应用领域

      农业研究:用于作物表型性状与蛋白表达的关联研究。

      药物靶点发现:筛选疾病关键蛋白、作用机制相关蛋白。

      机制研究:分析代谢通路、信号通路的动态调控变化。

      蛋白表达定量分析:高通量检测样本中蛋白质表达水平变化。

       

      技术优势

      专业设备:基于新一代timsTOF Pro2质谱仪,检测速度提升近一倍,通过捕集离子淌(TIMS)与同步累积连续碎裂(PASEF)扫描模式进行差异定量蛋白质组学研究;

      高精准:利用第四维“离子淌度”,有效区分同分异构肽段,显著提升鉴定准确性;

      高深度:蛋白鉴定水平提升近20%,具有更高的检测深度和覆盖度;

       

      服务流程

       

      样品接收标准

      样本

      要求

      备注

      植物组织

      ≥200 mg

      液氮速冻,-80℃保存,干冰运输,1天(5kg)2-3天(10-20kg)3-5天(20-30kg)

      动物组织

      ≥100 mg

      细胞类

      ≥5 x 107

      菌体

      ≥100 mg

       

      服务流程、周期及交付

      服务流程

      工作日

      交付材料

      蛋白提取及处理

      18个

      1、原始数据、结果图片

      2、标准实验报告(含实验步骤、流程)

      3、生信分析:鉴定数量分析、表达差异分析、功能分析

      DIA LC-MS/MS

      数据库检索

      定性定量分析

      生信分析

      实验报告

       

      数据分析

      标准数据分析内容

      鉴定分析鉴定与定量结果统计;单个样本蛋白质鉴定结果统计;韦恩图;主成分分析;PCC分析;RSD分析;蛋白质丰度分析
      差异表达分析差异结果统计;火山图;箱线图;雷达图;聚类分析图
      功能分析亚细胞定位;结构域分析;GO功能分析;KEGG/Reactome/ WikiPathways通路分析;GSEA分析;转录因子分析;激酶分析;互作网络分析;WGCNA分析
      质量控制QC样本评价;组间样本鉴定评价;样本定量波动评价;DIA体系评价
      高级数据分析
      临床药物研究药物靶点注释
      标志物的筛选集成机器学习
      分子分型无监督聚类分型分析

       

      案例报告

      1、鉴定数量分析

      图:DIA 鉴定结果统计柱状图

       

      2、表达差异分析

      图:groupvs 组差异表达蛋白质聚类分析图

       

      3、功能分析

      图:groupvs 组差异表达蛋白质亚细胞定位分布饼图

      图:亚细胞定位结果上下调比较柱状图

      图:groupvs 组所有差异蛋白质的 GO 富集 Circos

       

      3、质量控制(QC)

      图:QC 的 CV 值分布箱线图

      图:QC 的 CV 值分布图

      图:QC 样本的3D-PCA 图

       

      参考文献

      [1] Yu CS1, Lin CJ, Hwang JK. Predicting subcellular localization of proteins for Gram-negative bacteria by support vector machines based on n-peptide compositions. Protein Sci. 2004 May;13(5):1402-6.

      [2] Finn RD, Coggill P, et al., The Pfam protein families database: towards a more sustainable future. Nucleic Acids Res. 2016 Jan 4;44(D1):D279-85.

      [3] Ashburner, M., et al., Gene ontology: tool for the unification of biology. The Gene Ontology Consortium. Nat Genet, 2000. 25(1): p.25-9.

      [4] Gotz, S., et al., High-throughput functional annotation and data mining with the Blast2GO suite. Nucleic Acids Res, 2008. 36(10): p. 3420-35.

      [5] Kanehisa, M., et al., KEGG for integration and interpretation of large-scale molecular data sets. Nucleic Acids Res, 2012. 40(Database issue): p. D109-14.

      [6] Subramanian,A.,et al.,. Gene set enrichment analysis: A knowledge-based approach for interpreting genome-wide expression profiles. Proc Natl Acad Sci U S A.,2005, 102(43):15545-50.

      [7] Parker SJ, Rost H, Rosenberger G, Collins BC, Malmström L, et al. Identification of a Set of Conserved Eukaryotic Internal Retention Time Standards for Data-independent Acquisition Mass Spectrometry. Mol Cell Proteomics. 2015; 14(10): 2800-2813.

      [8] Li S, Cao Q, Xiao W, Guo Y, Yang Y, Duan X, Shui W. Optimization of Acquisition and Data-Processing Parameters for Improved Proteomic Quantification by Sequential Window Acquisition of All Theoretical Fragment Ion Mass Spectrometry. J Proteome Res. 2017; 16(2):738-747.

      [9] Wisniewski, J.R., et al., Universal sample preparation method for proteome analysis. Nat Methods, 2009. 6(5): p.359-62.

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