离子转运-酵母单基因验证

本服务利用遗传背景清晰的酵母（酿酒酵母）系统，快速、经济地验证与金属离子耐受性或稳态相关目标基因的功能。其核心方法是：基于在一种对金属离子过载高度敏感或离子吸收有先天缺陷的酵母突变体中进行的功能互补实验。通过观察转入的外源基因能否使缺陷的酵母突变体在某离子高/低浓度条件下生长，来判断该基因的功能。

所属分类

技术原理

应用场景

1、Fe³⁺:

（1）植物耐铁吸收基因的克隆与功能鉴定

（2）植物铁吸收和转运功能基因的研究

2、Zn²⁺:

（1）验证植物或动物来源的候选基因（如金属转运蛋白、螯合肽合成酶、转录因子）是否直接参与锌耐受或稳态调控

（2）快速比较同源基因家族不同成员的功能差异

（3）对已发现基因进行初步的突变分析，定位功能关键区域

3、K⁺:

（1）植物耐低钾高效吸收基因的克隆与功能鉴定

（2）钾离子通道/转运蛋白的结构与功能关系研究

4、Cd²⁺

（1）植物镉离子转运基因的挖掘与功能鉴定

（2）镉转运基因的调控机制与互作研究

（3）镉污染治理与耐镉作物育种

技术优势

1、严格设置空白对照：降低假阳性率，确保实验准确性。

2、表型对比直观：通过简单的平板点种实验，在不同离子浓度梯度培养基上，目标基因是否有表型的结果一目了然。

3、实验周期短、成本低：相对于在植物中进行的转基因验证（数月到数年），酵母验证通常可在1-2周内完成从转化到表型观察的全过程，大幅节省时间和资源。

4、适用于机理初探：可方便地构建目标基因的突变体（如点突变、结构域缺失），在缺陷的酵母突变体中快速测试其功能变化，初步解析关键功能位点。

5、遗传背景清晰：

（1）CCC1是酵母中的铁转运蛋白，其定位于液泡膜，并通过将多余的铁离子转运至液泡中以维持酵母细胞内铁的平衡，其功能缺失会使酵母对过量的铁变得敏感。

（2）锌敏感型酵母菌株zrc1基因缺失突变体。该基因编码液泡膜锌转运蛋白，负责将过量的锌离子隔离至液泡以解毒。zrc1突变体对环境中ZnSO₄高度敏感，为验证候选基因能否恢复锌耐受性提供了理想且特异的遗传背景。

（3）R542是Δ trk1Δtrk2双敲除突变体，自身钾吸收能力极弱，排除了酵母内源钾转运蛋白的干扰。

（4）YCF1 是酿酒酵母中编码液泡膜转运蛋白的基因，核心功能是重金属解毒，尤其对镉、铬等重金属的隔离与转运发挥着重要作用。Δycf1适合用于重金属解毒 / 转运相关的单基因功能验证，是该领域单基因验证的经典模式菌株。

收样标准

周期与交付