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    原核蛋白表达&Pull down

    Pull down是一种体外亲和纯化技术。该技术通过把X、Y两种蛋白在体外分别表达纯化后混合到一起,过蛋白X的抗体柱后,洗下柱子上的蛋白样并检测其中是否含Y。若X能把Y拉下来(即Pull down),说明它们有直接相互作用,反之则无。 X、Y蛋白的标签是不同的。 本项目提供"基因-蛋白表达-功能验证"一站式技术服务,从基因设计到蛋白表达,再到 DNA 结合功能验证,确保客户获得高纯度、高活性的目标蛋白及科学可靠的功能分析数据。

    • 产品描述
    • 服务描述

      Pull down是一种体外亲和纯化技术。该技术通过把X、Y两种蛋白在体外分别表达纯化后混合到一起,过蛋白X的抗体柱后,洗下柱子上的蛋白样并检测其中是否含Y。若X能把Y拉下来(即Pull down),说明它们有直接相互作用,反之则无。 X、Y蛋白的标签是不同的。

      本项目提供"基因-蛋白表达-功能验证"一站式技术服务,从基因设计到蛋白表达,再到 DNA 结合功能验证,确保客户获得高纯度、高活性的目标蛋白及科学可靠的功能分析数据。

       

      应用领域

      验证蛋白-蛋白互作

      研究信号通路中蛋白复合物组成

       

      技术优势

      高效表达系统:采用原核表达系统,操作简便周期短,可快速获得目标蛋白

      高精密度检测:采用Western Blot检测,精密度更高

      严格对照设计:提供各项完整对照,结果更严谨

      符合SCI标准:结果提供SCI标准图片,可直接应用于文章

       

      服务流程、周期及交付

      项目周期交付内容
      原核蛋白表达&Pull down35个工作日

      表达质粒(2ug左右)

      实验相关原始图片(蛋白表达SDS-PAGE鉴定、WB鉴定图片、pull down WB鉴定图片)

      标准的蛋白表达服务报告

       

      样品接受标准

      /

      样本

      要求

      五选一

      目标蛋白基因序列

      \

      载体/载体模板

      \

      菌液

      抗性,菌液量>0.5mL

      质粒

      抗性,质粒量>20ug

      平板菌

      无污染

       

      案例报告

      1、转化子筛选:鉴定所得到的转化子是否为正确插入目的基因。

      图1 转化子菌落PCR

      M: Marker, 1-8: 8个克隆PCR产物

       

      2、原核表达结果:SDS-PAGE检测目的蛋白表达情况。

      图2 SDS-PAGE检测

      M: Marker, 1: 纯化前, 2: 纯化后

       

      3、Pull down:Pull down检测His-A-GFP和FLAG-C、His-B-GFP和FLAG-C。

      IMG_256

      图3 Pull down验证C与A、C与B互作情况

      Input: 阳性对照, Ip:FLAG: 实验组

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