CrY2H-seq库与库筛选

Cre-LoxP原理的大规模蛋白互作筛选技术，这是一种以酵母双杂筛库体系为基础，用来筛选蛋白质相互作用的高通量方法。

所属分类

大分子互作平台

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产品描述

技术原理

Cre重组酶是一种DNA重组酶，能够识别和催化LoxP序列的重组。LoxP序列是一种特定的DNA序列，通常包含两个反向重复的13 bp序列，之间夹杂一个8 bp序列。Cre重组酶能够识别LoxP序列，并在两个13 bp序列之间切割DNA链，然后重新连接DNA链，导致DNA重组。

大规模蛋白互作筛选技术的基本原理如下：

1、构建Cre-LoxP系统载体：首先，需要构建包含LoxP序列的双向融合蛋白质表达载体，这个载体中包含要筛选的两个文库序列和LoxP序列。

2、蛋白质相互作用筛选：将构建好的Cre-LoxP载体应用到酵母双杂筛库体系中，如果两个蛋白之间发生相互作用，Cre重组酶可以识别并催化这个LoxP序列，形成一个新的序列片段。

3、筛选与鉴定：基于Cre-LoxP原理的酵母双杂体系筛选出互作蛋白，高通量测序，完成数据的处理分析。

通过这种技术原理，可以实现大规模蛋白互作筛选，从而研究蛋白之间的相互作用和功能。

服务简介

南京瑞源生物是一家专业从事蛋白互作验证服务的公司，已拥有成熟的酵母双杂实验体系。在此基础上，我们推出新的蛋白互作验证技术服务—基于Cre-LoxP原理的大规模蛋白互作筛选技术，这是一种以酵母双杂筛库体系为基础，用来筛选蛋白质相互作用的高通量方法。Cre-LoxP系统是一种广泛应用于转基因动物模型中的基因编辑技术，通过这一原理可以实现对特定DNA序列的可控切割和连接，在蛋白质相互作用筛选中，Cre-LoxP系统被利用来实现对蛋白质相互作用的筛选和鉴定。

技术优势

高通量筛选：Cre-LoxP系统可以应用于大规模蛋白质相互作用筛选，能够同时检测大量蛋白质之间的相互作用，提高筛选效率；

精确度高：由于Cre-LoxP系统具有较高的特异性和准确性，因此筛选出的蛋白质相互作用结果更加可靠和准确；

适用范围广：Cre-LoxP系统可以应用于多种细胞和生物体系中，适用性较广。

第三代测序：配合自激活验证，有效提高阳性互作率

服务流程

样本要求

交付展示

案例展示

1、CRE-LoxP体系库筛库阴阳性验证，阳性结果可发现Lox77重组位点且5’端为largeT序列，3’端为p53序列。

2、该体系应用于文库筛文库互作蛋白筛选，分析比对测序结果，可找到对应的互作蛋白，对文库筛文库三代测序结果进行分析，制作互作网络图。