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实时荧光定量PCR技术(Real-time Quantitative PCR,qPCR)是指在PCR反应体系中加入可与DNA产物特异性结合的荧光基团(包括荧光染料或荧光标记的特异性探针),对PCR产物进行标记跟踪,随着PCR反应的进行,反应产物不断累积,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一次荧光强度信号,这样即可通过荧光信号强度的变化实时监测整个PCR过程中产物量的变化,并结合相应软件对产物进行分析,可以得到荧光扩增曲线,从而计算待测样品中目的基因初始模版的量,常用于分析目的基因的表达水平的变化。
亚细胞定位即指某种生物大分子物质或脂类在细胞内存在的具体位置。蛋白质在细胞质中经过翻译并合成,由蛋白质分选信号引导而被转运到特定的亚细胞结构中以参与细胞的各种生命活动,这一过程称为蛋白质亚细胞定位。蛋白质的功能、代谢以及相互作用等都与其亚细胞定位密切相关,成熟蛋白质必须在特定的亚细胞结构中才能发挥正常的生物学功能,如果定位发生偏差,将对细胞功能甚至生命产生重大影响,因此对蛋白质亚细胞定位的研究具有重要意义。
CRISPR/Cas 系统可以把侵入细菌的噬菌体遗传物质整合到自身基因组一个或者多个CRISPR位点作为永久的“记忆”,当细菌被再次入侵的时候,CRISPR 位点被转录生成 CRISPR RNAs(crRNAs)。crRNA 随后会引导 DNA剪切酶 Cas9 根据序列互补的原则剪切入侵的外源核酸序列。
南京瑞源生物基于CRISPR-Cas12a技术推出酵母基因编辑服务(包含单基因敲除、多基因敲除、基因插入)。与传统的TALEN(转录激活子样效应物核酸酶)以及ZNF(锌指核酸酶)技术相比,CRISPR-Cas12a技术能够实现更高效更灵活的基因编辑。
南京瑞源生物通过自主研发设计实验流程,不断优化培养条件和转染方法,采用基于人胚肾293细胞/CHO细胞实现高效的哺乳动物细胞表达,能够进一步提高蛋白表达效率和产量,为生物制品的研发和生产提供更加有力的支持
南京瑞源生物提供酵母信号肽筛选及验证信号肽分泌功能服务。试验中选用的酵母菌株为缺失蔗糖转化酶基因、在以蔗糖为唯一碳源的培养基上不能生长的 YTK12。选用的载体质粒为含有色氨酸合成基因和一个缺失信号肽与起始密码子 ATG 的蔗糖转化酶基因(SUC2)的 pSUC2。 当一个具有功能的信号肽连接到 pSUC2的蔗糖转化酶基因之前时可以恢复蔗糖转化酶的分泌功能,从而使 YTK12菌株可在以棉子糖为碳源的缺陷型培养基上生长。 此外, TTC显色反应也常用于验证结果。
南京瑞源生物采用先进的Illumina测序平台,快速、高效地读取高质量的测序数据,以精准快捷为核心,准确检测样品间的重要变异信息,对候选基因进行注释后能通过荧光定量PCR、EMSA、酵母单杂、酵母双杂等实验进行候选基因验证。仅需客户提供原始材料,南京瑞源生物进行建库测序、BSA分析、基因挖掘、功能验证一条龙服务,节约客户等待时间。