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    科研服务

    立足于生命科学,为基础研究领域科学工作者提供生物学高端技术服务

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    EMSA

    凝胶阻滞或电泳迁移率实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一种研究DNA结合蛋白质和相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。

    所属分类

    • 产品描述
    • ▼ 服务简介

      凝胶阻滞或电泳迁移率实验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)是一种研究DNA结合蛋白质和相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。基于DNA-蛋白质或RNA-蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理,当转录因子与特异的DNA或RNA结合后,其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA,从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。

      这一技术最初用于研究DNA结合蛋白质,目前已用于研究RNA结合蛋白质和特定的RNA序列的相互作用。竞争实验中采用含蛋白质结合序列的DNA或RNA探针,和其它相关的探针,来确定它们相互作用的特异性及强度。

        

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      如图所示, DNA-复合物比非结合的探针移动得慢;当检测DNA结合蛋白,可用纯化蛋白、部分纯化蛋白或核细胞抽提液;竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA片段和寡核苷酸片段(特异)和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA结合蛋白的特异性;在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。

       

      ▼ 服务流程

      标准蛋白样品制备与定量 > 探针设计合成 > 蛋白与探针等进行反应 > SDS-PAGE电泳 > 紫外胶联 > 杂交孵育 > 图片扫描

        

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      ▼ 样品要求

      提供样品

      1)   活细胞(>2×10^7)、纯化的蛋白、DNA样品及序列;

      2)  目的蛋白一抗及其说明书;

      3)  基因信息、蛋白信息、物种信息;

      4)  阳性对照样品(尽量提供)。

       

      ▼ 交付标准

      1、原始数据、结果图片

      2、标准实验报告

      3、SCI标准Result Figure

       

      ▼ 服务内容

      服务项目

      说明

      报价

      周期

      荧光标记探针

       

      利用近红外荧光标记探与蛋白结合在疑胶板上通过

      近红外扫描仪直接测定电泳位置

       

      询价

      3~5个工作日

      蛋白标准样品的制备

      与浓度精确测定

      蛋白样品制备要现配现用

      1~2周

      EMSA凝胶电泳迁移检测

      1个探针和1个蛋白做一个EMSA反应

      (4条泳道,包括1条free probe泳道,3条蛋白梯度泳道)

      3~5个工作日

      结合蛋白的纯化与质谱检测

      (未知蛋白需要检测)

      条带切胶蛋白纯化,质谱检辺进行肽段检索与聚类分析

      1周

       

      ▼ 案例展示

        

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      电泳迁移率实验 凝胶阻滞实验 EMSA实验 EMSA电泳迁移

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