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    科研服务

    立足于生命科学,为基础研究领域科学工作者提供生物学高端技术服务

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    ChIP-seq

    本服务基于染色质免疫沉淀技术(ChIP),结合高通量测序(Seq),用于研究蛋白质与DNA在哺乳动物细胞中的相互作用。适用于转录因子结合位点、组蛋白修饰等表观遗传学分析。

    • 产品描述
    • 服务简介

      本服务基于染色质免疫沉淀技术(ChIP),结合高通量测序(Seq),用于研究蛋白质与DNA在哺乳动物细胞中的相互作用。适用于转录因子结合位点、组蛋白修饰等表观遗传学分析。

       

      技术体系

      载体构建 → 瞬时表达转染 → 目的蛋白WB鉴定 → ChIP富集 → 解交联与DNA纯化 → 测序(默认6G)→ 数据分析(peak calling、motif分析、GO/KEGG富集)

      技术优势

      1.实验与测序无缝衔接,交付完整数据分析报告,结果直接可用。

      2.样本适用性广,覆盖多种哺乳动物细胞及组织样本。

      3.实验全流程自主可控,数据真实可靠。

      4.载体构建到数据分析一站式服务,专业团队提供完整实验方案。

       

      服务内容

      服务项目

      服务内容

      自然日

      交付材料

      载体构建工作

      A、载体构建

      B、基因合成

      C、原质粒测序

      10个

      A、载体构建:无;

      B、基因合成:质粒、甘油菌;

      瞬时表达转染

      A、细胞培养;

      B、质粒抽提;

      C、细胞转染;

      D、瞬时表达;

      10个

      A、阳性鉴定结果图;

      目的基因表达鉴定

      A、目的蛋白提取;

      B、目的蛋白WB鉴定;

      10个

      A、目的蛋白WB鉴定图;

      ChIP-Seq

      A、组织交联;

      B、ChIP富集;

      C、诱饵蛋白鉴定;

      D、解交联与DNA纯化;

      E、Seq测序。

      10个

      A、诱饵蛋白的WB检测图;

      B、ChIP实验报告。

       

       

       

      收样标准

      类型送样标准运输条件
      需要基因合成的序列
      构建好的/中间载体质粒

      浓度>200 ng/uL,体积>20 uL;

      提供载体序列和抗性,无污染。

      冰袋
      含构建好质粒/含中间载体质粒的菌液

      体积>500 uL;

      提供载体序列和抗性,无污染。

      干冰寄送

      干冰使用量:1天(5 kg)、2-3天(10-20 kg)、3-5天(20-30 kg)

      平板菌无污染常温
      抗体 (常见标签抗体无需提供)IP级别抗体>30uL

      干冰寄送

      干冰使用量:1天(5 kg)、2-3天(10-20 kg)、3-5天(20-30 kg)

      动物组织

      质量:5-7g;

      PBS清洗后,滤纸吸干液体,用无菌剪刀剪成碎片(越小越好),收集到15 mL离心管中,液氮速冻5 min以上,-80 ℃保存。

      动物细胞3-5×107个/细胞冰袋

       

      应用场景

      1.验证特定转录因子在目标基因启动子区域的结合。

      2.研究组蛋白修饰(如H3K4me3,H3K27ac)在基因组特定区域的富集情况。

      3.解析表观遗传调控机制,如DNA甲基化与组蛋白修饰的相互关系。

      4.在药物开发中,评估化合物对靶蛋白与DNA结合能力的影响。

       

      交付内容

      交付内容解决问题
      数据质控(Raw Data QC)过滤低质量数据,保证数据可用
      基因组比对(Mapping)reads分布与比对率统计
      结合位点检测(Peak Calling)识别蛋白结合峰
      基序分析(Motif Analysis)鉴定结合序列偏好
      峰注释(Peak Annotation)关联基因元件,寻找靶基因
      差异峰分析(Differential Peak Analysis)筛选样本间显著变化区域。
      功能富集(Functional Enrichment)GO、KEGG通路分析
      可视化(IGV Visualization)浏览reads堆积与差异图谱

       

      参考文献

      [1] Nakato R, Sakata T. Methods for ChIP-seq analysis: A practical workflow and advanced applications. Methods. 2021;187:44-53. doi:10.1016/j.ymeth.2020.03.005

      [2] Huang X, Yip K, Nie H, et al. ChIP-seq and RNA-seq Reveal the Involvement of Histone Lactylation Modification in Gestational Diabetes Mellitus. J Proteome Res. 2024;23(6):1937-1947. doi:10.1021/acs.jproteome.3c00727

      [3] Wang Y, Zhao Y, Cao G, et al. STAT3 Facilitates Super Enhancer Formation to Promote Fibroblast-To-Myofibroblast Differentiation by the Analysis of ATAC-Seq, RNA-Seq and ChIP-Seq. J Cell Mol Med. 2025;29(11):e70639. doi:10.1111/jcmm.70639

      [4] Tu X, Mejía-Guerra MK, Valdes Franco JA, et al. Reconstructing the maize leaf regulatory network using ChIP-seq data of 104 transcription factors. Nat Commun. 2020;11(1):5089. Published 2020 Oct 9. doi:10.1038/s41467-020-18832-8

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