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瑞源生物
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- 产品描述
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技术介绍
依托成熟的大肠杆菌无细胞表达体系，在体外模拟细胞内蛋白转录翻译过程，实现目标蛋白的高效、快速合成。服务以目的基因为模板，利用大肠杆菌细胞抽提物中保留的完整转录翻译 machinery，通过添加氨基酸、能量物质及T7 RNA聚合酶等必需组分，在一个反应体系中完成蛋白表达。
图 无细胞蛋白表达体系原理如图所示 (Khambhati et al., 2019)
实验流程
技术优势
1、极速表达，周期短
无需细胞培养和转化步骤，从基因模板到蛋白合成仅需数小时，大幅缩短实验周期。
2、反应体系开放可调
可根据需求自由添加去垢剂、分子伴侣或辅因子，灵活优化蛋白折叠与活性条件。
3、突破细胞毒性屏障
可高效合成对宿主细胞具有生长抑制或致死效应的毒性蛋白，无活细胞培养限制。
4、有效改善难溶蛋白可溶性
通过调节反应环境或添加脂质体，促进跨膜蛋白等难度蛋白正确折叠，减少包涵体生成。
应用场景
1、高通量蛋白表达与酶工程筛选
2、毒性蛋白的功能性表达
3、合成生物学基因线路快速原型测试
收样标准
类型 送样标准 运输条件 需要基因合成的序列 无 无 构建好的质粒
中间载体质粒
浓度>100 ng/μL，体积>20 μL；
提供载体序列和抗性，无污染。
冰袋 含构建好质粒的大肠菌液
含中间载体质粒的大肠菌液
体积>500 μL；提供载体序列和抗性，无污染。 干冰寄送，干冰使用量：1天（5kg）、2-3天（10-20kg）、3-5天（20-30kg） 大肠平板菌 无污染 常温 注意：1、其余类型样品请提前与我司沟通；2、干冰取样及运输，至少在送样前2天通知我司。 交付内容
实验材料 周期 交付材料 1、 基因合成/载体构建 15天 1、原始数据、结果图片
2、标准实验报告(含实验步骤、流程)
3、含有目的基因的质粒及测序报告
2、 原核无细胞表达及鉴定 15个 案例展示
图 蛋白A原核无细胞表达蛋白与纯化结果
M：Protein Marker；1-2：无细胞表达后蛋白样品，IP纯化后蛋白样品
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