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    如何利用酵母系统进行蛋白质的表达

    发布时间:

    2023-09-14


     

    酵母表面展示

     

    服务简介

      酵母表面展示技术是一种真核蛋白表达系统,其利用酵母细胞表面展示系统(拥有完善的蛋白质翻译后修饰和分泌机制)将异源真核蛋白固定并展示在酵母细胞表面,已在蛋白质文库筛选、蛋白质定向进化、高亲和性抗体分选、抗原/抗体库构建、亲和力成熟、疫苗生产、免疫生物催化和生物传感器等多个领域应用广泛。

     

    技术优势

      Yeast display 与 Phage display 相比,酵母表面展示具有以下显著优势:

      1、酵母具有类似于高等真核生物的分泌途径, 蛋白质折叠在内质网中,其中伴侣蛋白,折叠酶和质量控制机制确保仅分泌正确折叠的蛋白质。而噬菌体是原核系统,有些抗体对大肠杆菌有毒的克隆,其生长缓慢甚至不生长,导致文库的偏向与克隆的丢失。

      2、通过噬菌体展示筛选更高亲和力的抗体时,通常会受到筛选处理过程的不利影响,不仅取决于亲和力,还取决于抗体表达水平。而酵母展示系统采用FACS分选技术,基于抗体亲和力及展示水平进行筛选,因此消除了表达引起的偏差,且能区分相差很小亲和力的克隆。

      3、酵母展示是多价展示,能够一次通过Sorting直接分选高,中&低亲和力的克隆,非常方便

      4、通过使用双染色的 FACS,可以直接在酵母细胞表面上确定抗体亲和力,从而无需耗时的亚克隆、表达和纯化。

      5、抗体筛选速度快,3min即可完成10万个细胞的分选,获得100+的unique sequence 候选克隆。

      6、在相同的展示系统下可对抗体的亲和力和稳定性进行优化。