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服务描述
猕猴桃（Actinidia chinensis）作为全球知名的 “维C之王”，是兼具营养与经济价值的特色果树，但其产业发展受限于病害威胁、传统育种周期长等问题。因此本项目通过猕猴桃遗传转化技术将外源功能基因导入细胞实现稳定表达，为定向改良猕猴桃农艺性状提供了关键技术路径，对推动猕猴桃产业高质量发展具有重要意义。
应用领域
1、品种改良：通过导入抗溃疡病、耐低温、耐干旱等抗虫抗逆基因，提升猕猴桃抗病抗逆能力、延缓果实软化、增强果实营养品质。
2、基因研究：解析猕猴桃果实发育、次生代谢、逆境应答等关键基因功能与代谢通路，为分子育种提供理论依据与基因资源。
3、功能果实开发：利用猕猴桃果实作为生物反应器，合成功能性成分，开发高营养保健型猕猴桃等品种，拓展猕猴桃在功能性食品等领域的应用边界。
4、生态种植：通过遗传转化提高猕猴桃砧木根瘤菌共生基因表达量，增强土壤氮素利用能力，培育对果园土壤中常见污染物具有吸附降解能力的品种。
5、种业服务：开发具有自主知识产权的优质转基因猕猴桃品种，同时提供猕猴桃遗传转化技术方案与配套试剂，支撑猕猴桃种业的技术创新与品种迭代。
技术优势
• 受体系统完善：我们拥有多种经过深度优化的高再生率猕猴桃无菌苗品系和愈伤组织系作为受体材料，显著提高了遗传转化的成功率与重现性。
• 定制化载体构建：可根据客户需求，快速构建针对猕猴桃密码子偏好性优化的基因过表达/单基因敲除，确保外源基因的高效、精准表达与调控。
• 分析鉴定：不仅提供T0代苗抗性基因PCR鉴定服务，同时可针对目的基因进行qPCR定量分析、Sanger测序服务。
服务流程
样品接收标准
类型 送样标准 运输条件 需要基因合成的序列 无 无 构建好的质粒
中间载体质粒
浓度>100ng/ul，体积>20 ul；提供载体序列和抗性，无污染 冰袋 含构建好质粒的菌液
含中间载体质粒的菌液
体积>500 ul；提供载体序列和抗性，无污染。 干冰，1天(5kg)、2-3天(10-20kg)、3-5天(20-30kg) 平板菌 无污染 常温 服务流程、周期及交付
物种 服务类型 品种 植物筛选抗性 服务周期 交付标准 猕猴桃 载体构建/基因合成 /
/
10个月
- 载体构建：非客户提供载体模板，不交付
B、基因合成：非客户提供载体模板，不交付
过表达 1、红阳
2、龙城 2 号（软枣）
3、脐红
kana 4-6个月 默认交付（抗性基因鉴定）：T0代抗性培养基上阳性苗≥8株；
若选择目的基因鉴定：
鉴定8株抗性苗，交付T0代阳性苗≥3株
单基因敲除 5-7个月 默认交付（抗性基因鉴定）：T0代抗性培养基上阳性苗≥2株；
若选择目的基因鉴定：
鉴定2株抗性苗，交付T0代编辑苗≥1株
过表达 1、海沃德
2、CD18（软枣）
kana 3-5个月 默认交付（抗性基因鉴定）：T0代抗性培养基上阳性苗≥8株；
若选择目的基因鉴定：
鉴定8株抗性苗，交付T0代阳性苗≥3株
单基因敲除 4-6个月 默认交付（抗性基因鉴定）：T0代抗性培养基上阳性苗≥2株；
若选择目的基因鉴定：
鉴定2株抗性苗，交付T0代编辑苗≥1株
过表达 其他品种 kana 4-6个月 默认交付（抗性基因鉴定）：T0代抗性培养基上阳性苗≥8株；
若选择目的基因鉴定：
鉴定8株抗性苗，交付T0代阳性苗≥3株
单基因敲除 6-7个月 默认交付（抗性基因鉴定）：T0代抗性培养基上阳性苗≥2株；
若选择目的基因鉴定：
鉴定2株抗性苗，交付T0代编辑苗≥1株
案例报告
a. 遗传转化
b. 转基因植株的鉴定
图：T0代过表达植株定量分析图
图：T0代敲除植株Sanger测序图
参考文献
[1] Yao W, Kong L, Lei D, Zhao B, Tang H, Zhou X, Lin Y, Zhang Y, Wang Y, He W, Li M, Chen Q, Luo Y, Wang X, Tang H, Zhang Y. An effective method for establishing a regeneration and genetic transformation system for Actinidia arguta. Front Plant Sci. 2023 Jul 31;14:1204267. doi: 10.3389/fpls.2023.1204267. PMID: 37583592; PMCID: PMC10425222.
[2] Wang Z, Wang S, Li D, Zhang Q, Li L, Zhong C, Liu Y, Huang H. Optimized paired-sgRNA/Cas9 cloning and expression cassette triggers high-efficiency multiplex genome editing in kiwifruit. Plant Biotechnol J. 2018 Aug;16(8):1424-1433. doi: 10.1111/pbi.12884. Epub 2018 Feb 6. PMID: 29331077; PMCID: PMC6041439.
[3]Luo X, Dou Y, Lang Y, Zhao H, Liu X, Zhang X, Li Y, Liang D, Xia H. CRISPR/Cas9-mediated editing of carotenoid biosynthesis genes alters carotenoid concentrations in kiwifruit. BMC Plant Biol. 2025 Aug 9;25(1):1056. doi: 10.1186/s12870-025-07112-6. PMID: 40783509; PMCID: PMC12335140.
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