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服务描述
苹果（Malus domestica）作为全球重要的温带果树，其产业发展面临病虫害胁迫、品质改良需求迫切、环境适应性不足等关键挑战。因此本项目通过苹果遗传转化技术将外源功能基因导入苹果细胞实现稳定表达，为定向改良苹果农艺性状、培育突破性新品种等方面提供了核心技术支撑，是现代苹果分子育种体系的关键组成部分。
应用领域
1、品种改良：通过导入抗黑星病、抗轮纹病、耐旱、耐低温等抗虫抗逆基因，提升苹果抗病抗逆性、延长货架期与果实营养价值。
2、基因研究：解析苹果果实发育、花青素合成、逆境响应等关键基因功能与代谢通路，为分子育种提供理论支撑。
3、功能果实开发：利用苹果果实作为生物反应器，合成功能性成分（或药用蛋白，开发 “保健型苹果” 或 “药用苹果”，拓展苹果在功能性食品与生物医药领域的应用。
4、生态种植：通过转化提高苹果砧木根际促生菌协作能力的基因表达量，增强土壤养分吸收效率；培育对果园常见污染物具有降解能力的品种，助力生态果园建设。
5、合成生物学应用：重构天然产物合成路径，设计适应极端气候（如高温高湿等）的基因型，培育能应对未来气候变化的苹果新种质，保障产业可持续发展。
技术优势
• 受体系统完善：我们拥有多种经过深度优化的高再生率苹果无菌苗品系和愈伤组织系作为受体材料，显著提高了遗传转化的成功率与重现性。
• 定制化载体构建：可根据客户需求，快速构建针对苹果密码子偏好性优化的基因过表达/单基因敲除，确保外源基因的高效、精准表达与调控。
• 分析鉴定：不仅提供T0代苗抗性基因PCR鉴定服务，同时可针对目的基因进行qPCR定量分析、Sanger测序服务。
服务流程
样品接收标准
类型 送样标准 运输条件 需要基因合成的序列 无 无 构建好的质粒
中间载体质粒
浓度>100ng/ul，体积>20 ul；提供载体序列和抗性，无污染 冰袋 含构建好质粒的菌液
含中间载体质粒的菌液
体积>500 ul；提供载体序列和抗性，无污染。 干冰，1天(5kg)2-3天
(10-20kg)3-5天(20-30kg)
平板菌 无污染 常温 服务流程、周期及交付
物种 服务类型 品种 植物筛选抗性 服务周期 交付标准 苹果 载体构建/基因合成 / / 10个 - 载体构建：非客户提供载体模板，不交付
B、基因合成：非客户提供载体模板，不交付
过表达 嘎啦 kana 3-5个月 默认交付（抗性基因鉴定）：T0代抗性培养基上阳性苗≥8株；
若选择目的基因鉴定：鉴定8株抗性苗，交付T0代阳性苗≥3株
单基因敲除 4-6个月 默认交付（抗性基因鉴定）:T0代抗性培养基上阳性苗≥2株;
若选择目的基因鉴定：鉴定2株抗性苗，交付T0代编辑苗≥1株
案例报告
a. 遗传转化
b. 转基因植株的鉴定
图：T0代过表达植株定量分析图
图：T0代敲除植株Sanger测序图
参考文献
[1] Zhang Y, Zhou P, Bozorov TA, Zhang D. Application of CRISPR/Cas9 technology in wild apple (Malus sieverii) for paired sites gene editing. Plant Methods. 2021 Jul 19;17(1):79. doi: 10.1186/s13007-021-00769-8. PMID: 34281579; PMCID: PMC8287690.
[2] Zhang Y, Bozorov TA, Li DX, Zhou P, Wen XJ, Ding Y, Zhang DY. An efficient in vitro regeneration system from different wild apple (Malus sieversii) explants. Plant Methods. 2020 Apr 21;16:56. doi: 10.1186/s13007-020-00599-0. PMID: 32336979; PMCID: PMC7175559.
[3] Li H, Sun H, Dong H, Wang S, Fan X, Li Y, Cheng L, Zhang Z, Wang Y, Zhang X, Xu X, Han Z, Li W. Genome editing of apple SQUAMOSA PROMOTER BINDNG PROTEIN-LIKE 6 enhances adventitious shoot regeneration. Plant Physiol. 2023 Feb 12;191(2):840-843. doi: 10.1093/plphys/kiac570. PMID: 36494099; PMCID: PMC9922382.
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