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- 产品描述
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▼ 服务简介
南京瑞源生物在基于经典同源重组系统的基础上,通过自主研发优化构建载体和实验流程,开发了一项敲除效率和准确性均远高于传统方法的创新性的同源重组改良技术。该技术可以广泛应用于酵母的基因编辑。
▼ 技术原理
外源DNA片段与酵母基因组中的靶基因具有高度同源性,可以被酵母细胞内的DNA修复机制识别并整合到基因组中。设计一个含有靶基因两侧同源序列的载体,中间插入一个选择标记基因(如抗生素抗性基因) 。这个重组载体通过转化进入酵母细胞后,可以在靶基因位置发生同源重组,导致靶基因被选择标记取代,从而实现基因敲除。
▼ 技术流程
▼ 技术优势
1、精确性:同源重组具有高度的特异性,可以精确地替换或敲除目标基因,而不会影响基因组中的其他部分。
2、稳定性:通过同源重组敲除的基因在酵母中可以稳定遗传,适用于长期研究。
3、多功能性:除了敲除基因,同源重组还可以用于基因插入、点突变等其他类型的基因组编辑。
4、操作简便:相比于其他基因编辑技术,同源重组法的步骤相对简单、容易操作。
▼ 样品要求
1、靶基因序列:需要知道目标基因的序列,以便设计同源臂和重组载体。
2、选择标记:需要一个筛选基因,如抗生素抗性基因,用于筛选成功重组的酵母细胞。
3、酵母菌株:需要选定适合的酵母菌株作为宿主细胞。
▼ 服务内容
基因敲除技术服务
基本步骤 详细步骤 周期(工作日) 交付材料 1、表型验证 菌株划线到相应培养基 5 个 1、质粒
2、敲除成功的菌株甘油菌、平板
3、测序文件
4、电子版实验报告1份
2、基因合成/质粒验证 1、提供序列:基因合成
2、提供质粒:测序验证
10 个 3、基因敲除 1、扩增敲除元件
2、重组转化
3、菌P验证
4、测序验证
15 个 ▼ 实验结果
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