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    科研服务

    立足于生命科学,为基础研究领域科学工作者提供生物学高端技术服务

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    酵母单杂交文库构建及筛选

    酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等

    所属分类

    • 产品描述
    • ▼ 服务简介

      酵母单杂交技术是在酵母双杂基础上发展而来的一种研究核酸-蛋白相互作用的工具,被广泛用于研究真核细胞内基因的表达调控,如鉴别DNA结合位点发现潜在的结合蛋白基因、分析DNA结合结构域信息等

      酵母单杂交

      ▼ 应用领域

      ▼ 服务流程

      文库构建流程

      单杂筛选流程

      ▼ 样本要求

          细胞样本:细胞数量大于1×107

          动物样本:大于1 g

          植物样本:大于2 g

          总RNA:大于200 µg

       

      ▼ 服务内容

      酵母文库构建

      基本实验步骤

      详细实验步骤

       周期  

      交付材料

      RNA提取

      RNA提取     mRNA分离

      5天

      酵母单杂文库甘油菌1.5ml EP管(1管)

      酵母单杂文库质粒1.5ml EP(1管)

      Word文档电子版项目报告

      cDNA文库构建

       

      cDNA合成与接头连接(三框库)

      cDNA按长度分离

      均一化处理(可选)

      重组到酵母单杂交载体pHis2上和电转化 

      文库检测和质粒提取

      数据整理和分析

       

      25天

       

      酵母单杂交文库筛选

      基本实验步骤

      详细实验步骤

       周期   

      交付材料

      启动子背景筛查

      Binding seq基因启动子的背景筛查

      10天

      阳性克隆测序结果

      Word文档电子版项目报告

      文库筛选

       

      诱饵质粒转化和文库质粒转化

      酵母筛选和3AT条件优化

      筛选结果测序

       

      30天

      回转验证

       

      筛选结果回转验证

      数据整理和分析

       

      10天

      阳性克隆酵母质粒

      Word文档电子版项目报告

       

      酵母单杂交一对一验证

      基本实验步骤

      详细实验步骤

       周期   

      交付材料

      启动子背景筛查

      Binding seq基因启动子的背景筛查

      10天

      阳性克隆酵母菌株

      Word文档电子版项目报告

      一对一验证

      实验组:pHis-A+pGADT7-B

      阳性对照      阴性对照

      10天

       

      ▼ 案例展示

       

      酵母单杂交 酵母单杂交文库构建  酵母单杂文库筛选  酵母单杂  酵母单杂文库

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