科研服务
立足于生命科学,为基础研究领域科学工作者提供生物学高端技术服务
- 产品描述
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▼ 服务简介
酵母具有与其他真核生物类似的蛋白质分泌途径,外源基因的分泌表达, 不仅方便了表达产物的分离纯化, 同时也和表达产物的翻译后加工有关, 很有意义。
酵母表达系统是研究真核蛋白质表达和分析的有力工具,瑞源生物的酵母分泌表达系统采用的宿主是巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris),该表达系统是近年来发展迅速、应用广泛的一种真核表达系统
▼ 技术原理
巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris)是甲醇营养型酵母菌,有两个乙醇氧化酶(Alcohol oxidase, AOX)编码基因AOX1和AOX2,两种序列相似,AOX1基因严格受甲醇诱导和调控。当甲醇为唯一碳源时,AOX1启动子可被甲醇诱导,启动乙醇氧化酶的表达,从而用甲醇进行代谢,含AOX1启动子的质粒可用来促进编码外源蛋白的目的基因的表达。
▼ 酵母分泌表达系统的优势
1、含有特有的强有力的AOX(醇氧化酶基因)启动子,用甲醇可严格地调控外源基因的表达。
2、培养成本低,产物易分离,毕赤酵母所用发酵培养基成本合理,一般碳源为甘油或葡萄糖及甲醇,其余为无机盐,培养基中不含蛋白,有利于下游产品分离纯化。
3、外源蛋白基因遗传稳定,外源基因能以高拷贝数整合到毕赤酵母基因组中,不易丢失并能得到高表达菌株。
4、作为真核表达系统,毕赤酵母具有真核生物的亚细胞结构,具有糖基化、脂肪酰化、蛋白磷酸化等翻译后修饰加工功能。
▼ 瑞源生物服务优势
1、具备完备的毕赤酵母表达平台,可以根据蛋白特性或客户的需求设计不同的实验方案;
2、具有高通量的筛选平台,可以快速有效的得到优异表达条件;
3、具有大规模发酵生产能力。
▼ 服务内容
瑞源生物科研人员建立了成熟的酵母表达纯化服务平台,提供优质的重组蛋白在毕赤酵母中的表达与纯化服务。
酵母分泌表达系统服务项目:
1、重组酵母表达质粒构建;
2、重组质粒电转化;
3、重组表达子筛选;
4、小规模蛋白表达和纯化(2L培养基培养产物)。
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