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cDNA文库构建

▼服务简介

cDNA 文库(Complementary DNA Library)是指某生物某发育时期所转录的全部 mRNA 经反转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而形成的克隆的集合。cDNA 是便于克隆和大量表达,它不像基因组含有内含子而难于表达,因此可以从 cDNA 文库中筛选到所需的目的基因,并直接用于该目的基因的表达。

通过构建 cDNA 表达文库可以提供构建分子标记连锁图谱的所用探针 ,更重要的是可以用于分离全长基因进而开展基因功能研究。因此,cDNA 文库在研究具体某类特定细胞中 基因组的表达状态及表达基因的功能鉴定方面具有特殊的优势,从而使它在个体发育、细胞 分化、细胞周期调控、细胞衰老和死亡调控等生命现象的研究中具有更为广泛的应用价值。

▼文库质量标准

库容≥1.0×106,普通样品平均插入片段长度≥1.0 kb

▼服务流程

1、总RNA提取;
2、mRNA纯化;
3、反转录合成cDNA第一链;
4、PCR扩增合成双链cDNA;
5、分级分离双链cDNA,去除小片段DNA;
6、双链cDNA的消化与连接。

▼样本要求

请您提供新鲜的且尽量多的材料

1、如果实验材料为动物组织材料,样品质量需大于5g。

2、如果实验材料为植物样品标本,样品质量需大于20g。 

3、如果实验材料为各种培养细胞,请您提供5×107以上培养好的细胞。 

4、您也可以直接提供给我们Total RNA,但要保证RNA没有降解,需要通过电泳等方法进行判断,其纯度要求A260/A280≥1.8,样品总量需大于500ug。 

▼服务内容

cDNA文库构建

服务项目

   周期   

交付材料

cDNA文库构建

4-8周

1、实验流程报告 
2、cDNA与载体的连接产物(20μl) 
3、QC报告 

▼服务说明

关于实验的具体内容及要求,请与我们联系沟通。 如果您提供给我们Total RNA样品,我们首先需要进行RNA质量及纯度的检测。 实验过程中,我们会随时与您沟通所发生的问题,以便双方共同协商解决。 
我们可以对构建好的文库提供后续附加服务,如克隆菌保、PCR扩增、大量测序等,实验费用需另计。

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