图片展示

IS-MPMI|重庆三峡学院汪开拓研究团队用Y2H技术揭示收获后葡萄受BABA引发防御影响的蔗糖和苯丙烷代谢的改变及相关转录机制

作者:南京瑞源生物技术有限公司 浏览: 发表时间:2021-09-01 13:21:35

防御诱导物可以诱导水果抗病性以控制采后腐烂,但可能会导致质量受损。我们目前的工作旨在研究由诱导物 β-氨基丁酸 (BABA) 诱导的灰葡萄孢抗性,并阐明与防御相关的代谢调节有关的特定转录机制。

重庆三峡学院汪开拓研究团队的黎春红以第一作者在IS-MPMI 发表了一篇名为“Alterations in sucrose and phenylpropanoid metabolism affected by BABA-primed defense in postharvest grapes and the associated transcriptional mechanism”的文章揭示了收获后葡萄中受 BABA 引发的防御影响的蔗糖和苯丙烷代谢的改变及相关的转录机制。


功能解剖结果表明,在接种真菌 necrotroph B. cinerea 后,10 mM BABA 处理转录诱导了一套关键基因编码酶,这些酶与葡萄中的蔗糖代谢和苯丙烷途径有关。相比之下,更多的 UDP-葡萄糖(苯丙烷和蔗糖代谢的共同前体)可能会被重定向到苯丙烷途径以合成植物抗毒素,包括反式白藜芦醇和 ε-葡萄素,在 100 mM BABA 处理的葡萄中,导致直接抗性,但降低了可溶性糖含量。分离并表征了来自葡萄树的 R2R3 型 MYB 蛋白 VvMYB44。VvMYB44的表达在葡萄表达防御反应时被显着诱导。亚细胞定位、Y2H 和 Co-IP 分析表明,核定位的 VvMYB44 在体内与 SA 响应转录共激活因子 NPR1 发生物理相互作用以进行防御表达。此外,VvMYB44 直接与蔗糖和苯丙烷代谢相关基因的启动子区域结合并激活它们的表达,从而打破抗真菌化合物积累和可溶性糖维持的平衡因此,这些结果表明2R型VvMYB44可能是BABA诱导的葡萄果实启动防御的潜在积极参与者,有助于避免采后贮藏期间可溶性糖的过度消耗。


结果表明,VvMYB44蛋白与AtMYB44聚集成同一分支;两个MYB蛋白之间共享一个分别包含约50个氨基酸残基的R2 HTH和一个R3 HTH(图S2)。AtMYB44积极调节拟南芥中的SA依赖性防御,以及来自V。B。灰霉病菌接种和BABA处理(图6A),表明R2R3型VvMYB44可能参与了BABA诱导的对葡萄果实中真菌病原体的防御。如图6B所示,含有pEAQ GFP盒的对照构建物在洋葱鳞茎表皮细胞的细胞核和细胞质中表达;相反,pEAQ-VvMYB44-GFP融合蛋白仅定位于细胞核内,如DAPI染色突出显示。在Y2H试验中,VvMYB44和VvNPR1之间的相互作用激活了报告基因HIS3、ADE2和MEL1,因为观察到转染BD-VvMYB44和AD-VvNPR1的AH109细胞在4-6天内在合成脱落板[TDO(SD/-Trp/-Leu/-His)和QDO(SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade)]上形成菌落簇,这些菌落在X-α-半乳糖平板上呈现白色到蓝色的变化(图6C)。此外,VvMYB44和VvNPR1之间的这种相互作用通过Co IP分析在足底得到证实(Fig. 6D)

先前的研究表明,大多数MYB蛋白通过与启动子中的MBS I[CNGTT(A/G)]和MBS II[C(G/T)T(A/T)GTT(A/G)]等MBS结合来增强其下游基因的转录本。我们通过SS2/SPS3/SPP1/UDPase3/AI/NI/PAL/4CL/C4H/CYP73A/STS1,随机鉴定了参与苯丙酸和蔗糖代谢的酶编码基因的启动子区域,其中至少有一个推测的MBS(数据S1)。值得注意的是,在酵母单杂交试验中,VvMYB44直接与SS2、SPS3、SPP1、UDPase3、AI、NI、PAL、4CL、C4H、CYP73A或STS1启动子内的MBS I或MBS II位点结合(图7A)。当SS2、SPS3、SPP1、UDPase3、AI、NI、PAL、4CL、C4H、CYP73A或STS1-Pro-LUC报告结构与VvMYB44共筛选时,LUC/REN比率增加更为强烈,明显高于空白对照组(35::62-SK+Pro::LUC)(图7B)。Y1H和DLR结果表明,VvMYB44可通过MBSs直接反式激活苯丙烷和蔗糖代谢酶编码基因的表达。

文献链接:https://doi.org/10.1094/MPMI-06-21-0142-R

IS-MPMI|重庆三峡学院汪开拓研究团队用Y2H技术揭示收获后葡萄受BABA引发防御影响的蔗糖和苯丙烷代谢的改变及相关转录机制
防御诱导物可以诱导水果抗病性以控制采后腐烂,但可能会导致质量受损。我们目前的工作旨在研究由诱导物 β-氨基丁酸 (BABA) 诱导的灰葡萄孢抗性,并阐明与防御相关的代谢调节有关的特定转录机制。
长按图片保存/分享
0
图片展示

电话:400-863-8520;025-5767-1761

邮箱:order@bestofbest.top

地址:南京市栖霞区仙林街道纬地路9号江苏生命科技园F7栋

图片展示

微信公众号

全资子公司

维百瑞生物

版权所有:南京瑞源生物技术有限公司|想了解酵母文库解决方案,技术服务,靠谱方法,多少钱,哪家好请联系我们.       苏ICP备20003978号

在线咨询

您好,请点击在线客服进行在线沟通!

联系方式
联系电话
400-8638520
联系电话
025-57671761
扫一扫二维码
二维码
添加微信好友,详细了解产品
使用企业微信
“扫一扫”加入群聊
复制成功
添加微信好友,详细了解产品
我知道了