从出生后第3天的小鼠OE中制备Poly（A）+RNA，逆转录，PCR扩增产生带有EcoRI和XhoI适配器的双链cDNA，用EcoRI和XhoI消化双链cDNA，用琼脂糖凝胶电泳（300–800bp）分离大小，并单向连接到pUSC2T7M13ORI载体，构建cDNA文库，筛选含信号肽序列的cDNAs将文库导入转化酶缺失酵母菌株YTK12中，选择含棉子糖的培养板，在含棉子糖的培养板上只生长含有cDNA衍生信号肽融合转化酶基因的转化子，在棉子糖培养板上生长的686个克隆中，对258个重组的cDNA插入片段进行了扩增和测序，在215个克隆中证实了一个假定的信号肽的存在，这些克隆编码49个单独的基因。

2013年日本研究团队在Journal of Neuroscience发表了一篇为“GoofyCoordinates the Acuity of Olfactory Signaling”的文章利用酵母信号肽跟踪筛选技术揭示了一种新型分子Goofy协调嗅觉信号的敏锐度。

在这项研究中，我们进行了小鼠OE cDNA文库的信号肽跟踪筛选，并鉴定了一种新型跨膜蛋白，该蛋白在OSNs和犁鼻感觉神经元（VSNs）中特异性表达并主要位于高尔基体中。因此，我们将该基因产物命名为Goofy（嗅觉神经元中的高尔基蛋白）。Goofy基因的遗传消融导致ACIII异常定位，嗅觉纤毛缩短，对气味的敏感性降低，这表明Goofy在嗅觉系统的功能中起着至关重要的作用。

识别新的跨膜和分泌分子的信号肽跟踪筛选方案

 信号肽跟踪筛选获得的单个49cDNA克隆的汇总表

为了寻找与OSNs的发育和/或功能相关的膜结合或分泌蛋白，我们采用了酵母信号肽跟踪筛选技术，该方法使我们能够选择性地分离出具有N末端疏水性信号肽的cDNAs编码蛋白。从P3小鼠的OE中制备Poly（A）+RNA，并在信号肽跟踪筛质粒（pSUC2T7M13ORI）中构建cDNA文库，该质粒含有无信号序列的截断转化酶基因。当cDNA文库被导入转化酶缺陷酵母菌株YTK12由于截短的转化酶与cDNA衍生的信号肽的框内融合，只有686个能够分泌转化酶的转化子能够在无葡萄糖、含棉子糖的平板上生长。在已测序的258个克隆中，215个克隆（83.3%）含有带有一段疏水氨基酸的典型信号肽，其中包括12个新基因（图1A，B）。随后，我们在小鼠头部切片上对这些基因进行了原位杂交分析，并确定了在OE中具有特异和稳健表达的克隆#123（指定为Goofy）。

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