条斑紫菜酵母双杂交文库的构建及PyMAPK5互作蛋白的筛选

中文标题:条斑紫菜酵母双杂交文库的构建及PyMAPK5互作蛋白的筛选

文章作者:董道英 孔凡娜

发表单位:中国海洋大学海洋生命学院

中文核心期刊海洋与湖沼

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研究结果

互作蛋白富集作用

酵母双杂一对一验证

研究内容

本研究采用Invitrogen体系首次构建了高质量的条斑紫菜酵母双杂交cDNA文库,与水稻酵母双杂交cDNA文库库容(2.9×106)、大豆(1.7×106)、玉米(2.56×107)相比,本研究酵母双杂交文库覆盖度较高,为条斑紫菜相关基因互作蛋白筛选奠定了基础。其中候选互作蛋白B.tubulin属于微管蛋白,微管和微丝共同组成植物细胞的骨架系统,微管骨架重组可调控细胞形状改变、细胞分裂和响应不同刺激的信号传导等过程。植物微管蛋白可以通过在MAPK蛋白激酶的磷酸化作用下,对细胞周期进行调节。

烟草研究中,MAPK/NTF6被激活后,可以磷酸化微管结合蛋白NTMAP65-1中579位的苏氨酸残基,调节有丝分裂M期及后期纺锤体的行为:拟南芥的AtMAPK4参与微管蛋白磷酸化调节,在细胞减数分裂中起作用。苜蓿丝裂原活化蛋白激酶SIMK,其活性变化调节微管蛋白细胞骨架变化,对细胞极性生长起直接作用。烟草的MAPK激活后,植物在黑暗中不会积累H202,细胞死亡延迟:拟南芥MPK4敲除后,叶绿体中活性氧代谢失衡,类囊体系统重排,PsII被损伤。

 

条斑紫菜酵母双杂交文库的构建及PyMAPK5互作蛋白的筛选
本研究采用Invitrogen体系首次构建了高质量的条斑紫菜酵母双杂交cDNA文库,与水稻酵母双杂交cDNA文库库容(2.9×106)、大豆(1.7×106)、玉米(2.56×107)相比,本研究酵母双杂交文库覆盖度较高,为条斑紫菜相关基因互作蛋白的筛选奠定了基础。其中候选互作蛋白B.tubulin属于微管蛋白,微管和微丝共同组成植物细胞的骨架系统,微管骨架重组可调控细胞形状改变、细胞分裂和响应不
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