中文标题：布鲁氏菌分泌蛋白 BspG 的亚细胞定位分析

文章作者：马忠臣，胡尊楠，张超，王震，王勇，陈创夫

发表单位：石河子大学动物科技学院

中文核心期刊：中国动物传染病学报

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讨论与结论：

布鲁氏菌传播方式多种多样，总的来说，其可以通过空气、气溶胶、食物及动物配种进行传播。布鲁氏菌进入机体后，最终会通过免疫细胞转移至区域淋巴结中，并引起机体的感染，其感染机制与布鲁氏菌在宿主细胞中的互作机制是密切相关的。T4SS 分泌的蛋白在布鲁氏菌感染机体、抑制宿主细胞分泌及抗细胞凋亡中有重要作用。布鲁氏菌是通过一个以上的易位系统混合易位而不仅仅依赖 T4SS 进行分泌。耶尔森氏菌 YplA和沙门氏菌 SptP可以通过 III 型分泌系统（T3SS）和鞭毛两个途径分泌效应物质进入宿主细胞。布鲁氏菌含有成型鞭毛系统，其中包含许多功能性鞭毛， 因此猜测 BspG 被 T4SS和有功能的鞭毛共同靶向易位至宿主细胞，但该说法还有待验证。

pDsRed2-C1-BspG DAPI MergeAB12在本研究中，生物信息学分析显示， BspG 蛋白无跨膜结构，有信号肽，是一种分泌蛋白，还有一定数量的抗原决定簇，表明 BspG 蛋白被分泌后会存在信号肽切除等加工修饰过程， 其作为抗原还可以引起良好的免疫反应。另外， BspG 蛋白具有核定位信号(NLS)及核输出信号(NES)，其可能在宿主细胞核-胞之间穿梭。通过共聚焦显微镜观察，可以发现 BspG蛋白(红色荧光)与细胞核(蓝色荧光)发生共定位(图 11)，存在于细胞核及其周围，证实了生物信息学方法的预测结果，这与 Myeni所述一致， BspG 蛋白会进入宿主细胞核。另外，在镜下还观察到 BspG 蛋白大多数存在于细胞核中，且荧光呈点状，小而细，这与我们所观察到的另外一个布鲁氏菌所分泌的入核蛋白 BspJ有所不同，对于 BspG 和 BspJ 进入细胞核是否有相同的机制及功能还有待验证。BspG 进入宿主细胞细胞核后，可能会影响宿主细胞的转录过程，进而影响基因的表达。这可能会影响宿主细胞的生存、繁殖和分泌作用，从而更有利于菌体自身的胞内生存。总的说来，本研究成功对布鲁氏菌分泌蛋白 BspG进行了生物信息学分析及亚细胞定位，证明其被分泌会进入宿主细胞核，可能存在核-胞穿梭机制，这为 BspG 蛋白的功能及分子机制研究奠定了基础。

研究结果：