Anti-GFP标签蛋白免疫沉淀试剂盒(磁珠法)
▼产品简介
免疫沉淀或免疫共沉淀是研究蛋白或蛋白与蛋白相互作用(Protein-Protein Interactions, PPIs)的常用实验技术，通过使用特异性抗体和可结合抗体的介质(如Protein A/G Agarose或Protein A/G磁珠)，或直接使用偶联特异性抗体的介质(如琼脂糖凝胶或磁珠)，然后通过离心或磁力从溶液中分离出抗原和抗体复合物，从而将目标蛋白质从复杂样品中分离出来，随后可以用于Western印迹检测或质谱分析等。
GFP标签的优点是便于观察，适合于观察蛋白在细胞内的定位，不用破碎组织细胞、不加任何底物、不用抗体，直接通过荧光显微镜就能在活细胞中观察到发出的绿色荧光，实时观察目的蛋白的表达情况，而且荧光性质稳定，细胞内的其它产物不会干扰GFP标签蛋白的检测，从而使其检测快速、简便、灵敏度高、重现性强，所以GFP被誉为活细胞探针。
▼产品规格
产品编号
CAT：RY8023
产品规格
| 配体 |
抗GFP标签抗体 |
|
磁珠表层材料 |
超顺磁亲水高分子磁珠 |
|
粒径大小 |
200nm |
|
浓度 |
10mg/ml |
|
结合量 |
>1.2mg/ml磁珠（对GFP标签蛋白的结合量） |
|
建议pH使用范围 |
6~8 |
|
沉降系数 |
2mg/ml磁珠在60ul以下体积沉降时间应该不大于10s |
|
磁珠保存液 |
1*PBS |
|
保存 |
4℃，禁止冷冻，使用前请充分混匀 |
▼产品概述
抗GFP标签抗体免疫磁珠由高性能的特异性 IgG1 单克隆抗体与磁珠共价偶联，后期经过封闭处理，可以直接用于捕获GFP标签蛋白，具有较高的GFP标签融合蛋白结合量以及非特异结合低的特点，可用于GFP标签蛋白免疫沉淀以及蛋白的分离纯化。
▼应用场景与产品优势
Anti-GFP磁珠，也称Anti-GFP免疫磁珠或GFP抗体磁珠，是由高品质的重组GFP抗体与纳米级氨基磁珠共价偶联而成，可特异性地与动植物或微生物裂解液、血清、腹水等中含有GFP标签的蛋白结合，从而用于带有GFP标签的融合蛋白或其蛋白复合物的免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、免疫共沉淀(Co-IP)或纯化。
本产品特异性强，靶蛋白结合量高：每毫升磁珠悬浊液含约10mg磁珠，含有不少于0.6mg GFP抗体，通常可结合不少于1.2mg GFP标签融合蛋白，具体的较大结合量和标签蛋白的分子量大小等相关。每500微升样品，通常仅需使用10-20微升磁珠悬浊液，就可以高效地进行免疫沉淀实验。
▼服务项目
▼实验流程
1.磁珠的准备
1.1 用移液枪轻柔吹打重悬Anti-GFP标签免疫磁珠，转移10-20 μL免疫磁珠到新的离心管中（实际取用量可根据样品中目的蛋白的含量适当增减）。
1.2 加入1ml PBS缓冲液，用移液枪轻柔吹打重悬免疫磁珠，磁力架上静置实现磁液分离后, 移除上清，重复上述步骤2次。
2.样品的结合
2.1 加入500 μL细胞裂解液，室温旋转混匀孵育2小时或者4°C条件下过夜。
2.2 磁力架上静置实现磁液分离后，将上清液转移到新的离心管中备用（上清液可能还有过量的GFP标签目的蛋白）。
3.磁珠洗涤
3.1 加入1mL PBS缓冲液洗涤磁珠，磁力架上静置实现磁液分离后, 移除上清。
3.2 重复洗涤大约3次。
4.目的蛋白洗脱
4.1对于直接检测目的蛋白的情况，在上述所得沉淀中加入50 μL 1×蛋白上样缓冲液，煮沸5 min，在磁力架上静置实现磁液分离后，吸取上转移到新的离心管中。
4.1 取上清进行SDS-PAGE检测。
▼实验案例
▼技术支持
本公司产品使用过程中如有任何疑问与建议，欢迎随时与我们联系：market@bestofbest.top
在线咨询
